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層析冷柜工作原理

點(diǎn)擊次數(shù):4565    更新時(shí)間:2015-08-14

層析(也叫層析柜),與普通的儲(chǔ)存柜有何不同?它又是如何工作的?且讓拓紛為您簡(jiǎn)單介紹下層析工作原理。

生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間能夠實(shí)現(xiàn)專一而可逆的結(jié)合,這種結(jié)合力就稱為親和力。親和層析就是通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對(duì)另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱為配體,配體和基質(zhì)是共價(jià)結(jié)合的,構(gòu)成親和層析的固定相,稱為親和吸附劑。親和層析時(shí)首先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質(zhì)作為配體,并將配體共價(jià)結(jié)合在適當(dāng)?shù)牟蝗苄曰|(zhì)上。將制備的親和吸附劑裝柱平衡,當(dāng)樣品溶液通過(guò)親和層析柱的時(shí)候,待分離的生物分子就與配體發(fā)生特異性的結(jié)合,從而留在固定相上;而其它雜質(zhì)不能與配體結(jié)合,仍在流動(dòng)相中,并隨洗脫液流出,這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過(guò)適當(dāng)?shù)南疵撘簩⑵鋸呐潴w上洗脫下來(lái),就得到了純化的待分離物質(zhì)。

層析就是根據(jù)這個(gè)工作原理,利用不同物質(zhì)理化性質(zhì)的差異而建立起來(lái)的層析技術(shù),為實(shí)驗(yàn)提供適合的溫度環(huán)境。所有的層析系統(tǒng)都由兩個(gè)相組成:一是固定相,另一是流動(dòng)相。當(dāng)待分離的混合物隨流動(dòng)相通過(guò)固定相時(shí),由于各組分的理化性質(zhì)存在差異,與兩相發(fā)生相互作用(吸附、溶解、結(jié)合等)的能力不同,在兩相中的分配(含量比)不同,且隨流動(dòng)相向前移動(dòng),各組分不斷地在兩相中進(jìn)行再分配。分部收集流出液,可得到樣品中所含的各單一組分,從而達(dá)到將各組分分離的目的。

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